НГС.Бизнес - Деловой интернет-журнал

НГС.Форум /Бизнес / Свое дело /

Для поболтать в пятницу. Автоматизация и налоги

  • В ответ на: изучи для начала картинку ниже.
    Хорошо подумай.
    чо б тебе такого на заборе у дома нарисовать, чтобы ты задумался... :dnknow: :biggrin:
    может, букву какую? :rofl:

    >>>Come back to USS...A © >>>
    долой лицемерие!

    запустить ракету вокруг Америки может быть не менее сложно и полезно, чем когда-то вокруг Земли

  • В ответ на: Сейчас священная война и всё такое. Ближний восток, зелёное знамя. Как с ними быть? 90% ничего не получают с этого мракобесия. Со мной, кстати, согласны многие эксперты и историки - насчёт простых ответов.
    Какая священная война? ИГ что ли священная? Обычное бандформирование, возникшее в условиях дефицита государственного регулирования.

    Уроки налоговой схемотехники

  • В ответ на: еще раз, для тех кто на бронепоезде.
    нет смысла "потреблять" информацию, если она изначально содержит
    неверные штампы или недостоверную информацию.
    об этом речь.
    значит исполнитель подошел к задаче/изучению поверхностно
    и выводы аналогичные.
    Женя, сам то не любишь на бронепоезде кататься?
    Тебе твою статью про Убер напомнить? :rofl:

    Уроки налоговой схемотехники

  • В ответ на: Где "сокращенное безработное вышеуказанное" будет брать бабло ....
    Простые жизненные наблюдения показывают, что даже самые самые неимущие, какое то бабло имеют.
    Позавчера подвозил из гаража бомжа. Он там живет более 10 лет. Одно время его держали дворником, с осени и этого нет.
    Попросил подвезти до магазина, купить жрачки да опохмел, вечером перебрал малость. Вот где он берет? При том, что у него ограниченная подвижность, и он не ворует.
    Вся его жизнь сплошное предпринимательство. Даже в таких условиях он находит, что можно сделать полезного людям и заработать. Вот на такой свой уровень жизни. А у нас тут белая кость, да голубая кровь, решает проблему кормления серой массы. Может религией какой подурачить, пусть бога боятся. Даже как то стыдно за них.

    Be yourself, no matter what they say.

  • В ответ на: Мда, неприятный ты мужик, Федот.
    Кто бы сомневался.
    Мне все так говорили, особенно во времена разбрасывания плюшек, кому я правду-матку в глаза резал. Некоторые правда потом кардинально меняли своё мнение, когда приходило время собирать плюшки, да Бог с ними с убогими.

    В ответ на: Имхо, сейчас нужно активно религию и церковь прокачивать. Как ни крути, это наилучший способ вложить низшим слоям в голову правила вроде "не убей", да ещё и даёт возможность подвесить над паствой страшные кары за непослушание.
    Чья глубокая мысль?

    Понимаешь дружище, услышать такое от человека доказавшего теорему Пуанкаре, обнаружившего бозон Хиггса, разработавшему дизайн и синтез молекулярных машин, проводящему операции на живом сердце ну направление мысли я думаю понятно, обидно конечно, но ты хотя бы осознаешь всю реальную полезность данных гуманоидов для развития всего социума в целом. Хотя мне подобные высказывания от людей такого уровня не встречались как-то.
    Есть чем похвастаться на таком уровне социальной полезности?

    Ну и наконец, чтобы активно религию и церковь прокачивать необходимо иметь несколько другой уровень возможностей, например освободить РПЦ от уплаты таможенных пошлин на табачную и алкогольную продукцию, выделить ей квоты на беспошлинный экспорт нефти ну и тому подобные приятные мелочи.
    Мне вот только до сих пор непонятны все эти сопли с сахаром по поводу больных детишек чуть ли не на всех ТВ каналах, если не допустить конечно, что ЦБ РФ лишил Эргобанк лицензии за незаконный вывод валютных средств непосредственно на счет Архангела Гавриила.

    Will the circle be unbroken
    By and by, Lord, by and by
    There’s a better home awaiting
    In the sky, Lord, in the sky

  • В ответ на: просто воняет такой высокомерной уверенностью
    Поверь, на самом деле я няшка:смущ:

    AC⁄DC – TNT

  • В ответ на: Есть чем похвастаться на таком уровне социальной полезности?
    - разработка нового метода масс-спектрометра на основе явления мягкой неразрушающей абляции под воздействием терагерцового излучения на базе лазера на свободных электронах. В приложении к сегменту биомакромолекул даёт возможность проводить точный масс-спектральный анализ при использовании времяпролетных масс-спектрометров. Создание опытного образца масс-спектрометра, .... (тут ещё можно много букв и высокомерных слов написать)
    В общем, не то чтобы вах как круто и мировая известность, но горжусь своим самым прямым непосредственным участием. Что-то изменилось? Ценность моих сообщений резко возросла? Брось ты это, оно на самом деле неважно.

    В ответ на: Мне вот только до сих пор непонятны все эти сопли с сахаром
    Поддерживаю, также думаю каждый раз.

    AC⁄DC – TNT

  • И что, таки биомакромолекулы неразрушаясь аблируют? Я бы посмотрел на доказательства.

    Be yourself, no matter what they say.

  • В ответ на: даже самые самые неимущие, какое то бабло имеют.
    Форумчанин подает в банк заявку на кредит и в бизнес-плане, в разделе оценки рынков сбыта у него записан этот постулат.
    Вот аналитики оху..дивятся-то! :biggrin:
    В ответ на: у него ограниченная подвижность, и он не ворует.
    И какова его доля на рынке потребления? А похужеют условия и начнет как многие другие на его уровне, нет, не воровать, так, демонтировать и сдавать в скупку металлы, составляющие чужое имущество.

    В ключе автоматизации вышеуказанный постулат звучит так:
    - В представленном проекте не видно чтоб к роботам-манипуляторам было подведено силовое питание! Как они работать-то будут???
    - Даже самые самые неимущие какое-то бабло имеют, а уж дорогостоящий робот-то тем более сам должен уметь добывать себе батарейки.
    Так и представляю, катается по "Меге" тот беленький робот (выше фотка от Н777), подкатывает, грустно опускает свои синие светодиодные глАзки, играет душещипательная мелодия, на мониторе картины голода и разрухи и бегущая строка понизу: "Люди добрые, подайте на "энерджайзер"!"
    А из-за его спины немного тянет озоном и слышно потрескивание электрошокера... :злорадство:

  • Нет, в ключе автоматизации это звучит так: даже когда тебя выкинут с работы и ты не имеешь официального дохода, ты можешь себя обеспечить, если захочешь, и даже, без нарушения закона. И не надо сильно париться за тех, кого заменили роботы, предпринимателем может стать каждый. Правда некоторые нуждаются в хорошем подсрачнике, прежде чем поймут.

    Be yourself, no matter what they say.

  • В ответ на: Даже как то стыдно за них.
    А мне нравица :yes.gif:
    Ибо у кого еще прочтешь, что тебя ждет в будущем :not_i:
    А тут все понятно - выдадут сухпаёк и телек заставят на всю мощность смотреть. Лафа, а не жизнь.

    Ум, честь и совесть форума "Свое дело. НГС" (по признанию 84,9% голосовавших анонимно форумчан)

  • В ответ на: И что, таки биомакромолекулы неразрушаясь аблируют? Я бы посмотрел на доказательства.
    А что, появились таки сомнения?)

    AC⁄DC – TNT

  • Ага, Азимовы с Бредберями и Стругацкими в одном флаконе, косяком повалили. Интересно, как ты думаешь, они это печатать будут? Отдельными томами.

    Be yourself, no matter what they say.

  • Ага, появились. Насколько мне известно содержание этого термина, там сплошь жесткое разрушительное испарение с поверхности под мощным излучательным воздействием. Практически пиролиз от паруса, с той лишь разницей, что нижние слои остаются холодными. Просто не успевают нагреться. И отлетают оттуда не макромолекулы, а их шматки, какие придется.
    Да масспектрометр и не видит молекулы, если быть точным, только ионы.

    Be yourself, no matter what they say.

  • В ответ на: и даже, без нарушения закона.
    В таком случае тот подвезённый обязан декларацию о доходах подавать. Вот только её не примут потому как он адреса не укажет. Не срабатывает постулатик-то... :dnknow:
    В ответ на: предпринимателем может стать каждый.
    Так экономически-то каждый пролетарий - предприниматель, ибо ищет сбыт своей рабсилы, находит, продает и так пока сохраняется спрос, потом снова ищет.

    А с налогами-то всё ровно будет до какой-то поры, доходы есть, расходы есть, роботы входят в ОПФ, так что базы все прежние. С пенсионным проблемы нарастать будут.

  • Ну, не примут, и замечательно, это уже не его проблемы. Как и пенсионные, она ему не грозит.я не те законы имел в виду. Законы, за которые бьют. Ну там не убий, не укради.... А макулатурные ему не грозят, тут все норм.

    Be yourself, no matter what they say.

  • Коллеги, знакомые, товарищи.

    У меня есть предложение: давайте попробуем вопросы автоматизации и налогов (тема топика), обсуждать без привлечения к вопросу: Веры, религии, церкви.
    Понимаю что для некоторых это может показаться архисложным.

    Но вдруг получится?

    "Никогда не спорьте с идиотами. Вы опуститесь до их уровня, где они вас задавят своим опытом". Марк Твен

  • В ответ на: Да масспектрометр и не видит молекулы, если быть точным, только ионы.
    Всё, уел меня. Сейчас пойду, съем свой пропуск, а на закуску поищу дисеры по теме :rofl:
    Насчёт абляции ты в общем прав. Но только вспомни о применении методов получения молекулярных ионов, основанные на двух принципах: ....
    Показать скрытый текст
    основанные на двух принципах: MALDI (Matrix Assisted Laser Desorption Ionization) и ESI (Electro Spray Ionization). В методе MALDI фотоны лазерного луча ионизуют и испаряют матрицу мишени, на которую нанесен образец, а
    образующиеся из матрицы ионы, как и в методе химической ионизации, ионизуют молекулы образца, не разрушая их. Джон Фенн и Коичи Танака были удостоены Нобелевской премии в 2002 году за разработку методов. К сожалению, эти методы применимы только для анализа биополимеров определенной физико-химической природы и не охватывают широкий круг водонерастворимых протеинов, полисахаридов и ДНК больших молекулярных масс.
    Современные методы масс-спектрометрического анализа позволяют детектировать не более половины известных белков и небольшие фрагменты молекул ДНК. Особые трудности возникают при попытках десорбции и получения молекулярных ионов ДНК и полисахаридов. Несмотря на неоднократные попытки десорбции ДНК с твердых поверхностей, успешным оказалось только использование специальных матриц (технология MALDI).
    Переведены в газовую фазу наночастицы различной природы: фуллереноподобные структуры молибдена, наночастицы двуокиси кремния, наноалмазы и биополимеры в виде наночастиц. Показано, что зависимость геометрического размера фрагментов ДНК носит линейный характер.
    Скрыть текст


    Асис, на самом деле даже не представляешь, насколько приятно, когда хоть из обычной жизни понимает такие штуки.

    Если коротко, то смысл мягкой абляции можно обрисовать как-то так:
    Показать скрытый текст
    Водородные связи относят к числу слабых химических взаимодействий, для них характерна сравнительно низкая прочность: энергия водородной связи в 5–10 раз ниже, чем энергия химической связи. По энергии водородные связи занимают промежуточное положение между химическими связями и Ван-дер-Ваальсовыми взаимодействиями. Терагерцовое излучение по энергии кванта лежит в области энергий водородных и Ван-дер-ваальсовых связей (~0,01 эВ). Энергия одного кванта излучения на порядки меньше энергии химических связей в молекуле, поэтому энергии терагерцового кванта недостаточно для разрыва ковалентной связи в молекуле, а для разрыва водородной связи достаточно энергии 10 - 100 квантов. Поскольку энергия терагерцового кванта мала, можно ожидать, что в процессе десорбции в газовую фазу будут переходить молекулы, сохранившие ковалентные связи. Такой процесс был действительно обнаружен и назван мягкой неразрушающей абляцией. На данный момент физические механизмы мягкой абляции до конца не ясны. Один из предполагаемых физических механизмов мягкой абляции – поглощение терагерцового излучения водой. Вода, присутствующая между частицами образца, поглощает излучение во вращательной части спектра. Поглощенная энергия переходит из вращательной в поступательную энергию движения молекул, что ведет к увеличению температуры. В конечном счете повышение температуры ведет к ее импульсному испарению, что выводит в газовую фазу часть макромолекул образца вместе с водяными парами.
    Скрыть текст


    Если интересно почитать что-то конкретное, разверни спойлер ниже. Там выжимка работы по исследованию двухцепочечных молекул ДНК больших размеров и гибридизованных молекул ДНК с олигонуклеотидами на поверхности биочипа без разрушения их первичной структуры.

    Показать скрытый текст
    Для исследования молекул ДНК существует мощный арсенал методов, позволяющих характеризовать как их физико-химические, так и молекулярно-генетические свойства. Современные тенденции использования ДНК в нано- и биотехнологиях ставят задачу разработки новых методов анализа молекул ДНК на основе развивающейся приборной базы. К таким методам, позволившим получить новые знания о молекулах ДНК, относятся в частности атомно-силовая микроскопия и манипулирование единичными молекулами ДНК с помощью лазерного пинцета. Настоящая работа посвящена разработке метода десорбции молекул ДНК с твердых подложек и из жидкой фазы с помощью терагерцового излучения. Перевод ДНК в газовую фазу позволит расширить спектр методов анализа этого биополимера. С молекулами и молекулярными ионами в газовой фазе оперируют методы масс-спектрометрии, спектроскопии, физики аэрозолей, нанотехнологии. Масс-спектрометрия для анализа ДНК используется значительно меньше, чем для анализа белков, как раз в силу сложности получения молекулярных ионов ДНК в газовой фазе. Использование терагерцового излучения для десорбции ДНК позволит переводить в газовую фазу достаточно большие фрагменты, что расширит возможности масс-спектрометрии ДНК.
    Одним из самых мощных источников терагерцового излучения является Новосибирский лазер на свободных электронах (ЛСЭ). Характеристики Новосибирского ЛСЭ позволяют проводить уникальные эксперименты по применению терагерцового излучения в научных исследованиях, в том числе и для перевода в газовую фазу и получения молекулярных ионов ДНК.
    Проводилась разработка метода перевода в газовую фазу двухцепочечных молекул ДНК больших размеров (три тысячи пар оснований и более) и одноцепочечных молекул ДНК, гибридизованных с олигонуклеотидами на поверхности модельного биочипа, без нарушения их первичной структуры под действием терагерцового излучения для молекулярно-генетического анализа и экспериментов с ДНК в газовой фазе.

    Терагерцовое излучение лазера на свободных электронах впервые использовано для исследования ДНК. Проведённое исследование доказывает сохранение способности к передаче наследственной информации, структуры и молекулярно-генетических свойств ДНК после перевода их в газовую фазу с помощью разработанного метода. Впервые показана возможность применения метода для десорбции одноцепочечной целевой ДНК, гибридизованной на модели биочипа. Под действием терагерцового излучения впервые осуществлен перевод различных макромолекул ДНК в газовую фазу, в том числе ДНК больших размеров (три тысячи пар оснований и более). На примере плазмиды pUC18 показано сохранение структуры и молекулярно-генетических свойств ДНК, в том числе способности к трансформации клеток E. coli и репликации своего генома. Таким образом, доказан неразрушающий характер процесса десорбции ДНК с твердых подложек под действием терагерцового излучения с длиной волны 130 мкм, показана применимость метода для десорбции одноцепочечной целевой ДНК, гибридизованной на модели биочипа.
    Впервые проведены измерения размеров частиц, образуемых молекулами ДНК в газовой фазе. Установлена зависимость размеров частиц ДНК в газовой фазе от длины взятой ДНК. В диапазоне длин от 6 500 п.н. до 40 000 п.н. получено соответствие размеров частиц ДНК размерам, полученным с помощью теоретического моделирования процесса конденсации и формирования глобулы ДНК.
    Перевод ДНК с помощью терагерцового излучения в газовую фазу назван методом мягкой неразрушающей абляции. Открытие явления мягкой неразрушающей абляции признано достижением РАН за 2006 г.

    Разработан метод, позволяющий переводить в газовую фазу рекордно большие молекулы ДНК, вплоть до генома фага λ (48 500 п.н.), что открывает широкие возможности для определения размеров и масс ДНК. Созданный в результате работы способ десорбции молекул ДНК может быть использован как для разработки методов масс-спектрометрического анализа генетических макромолекул, так и для применения стандартных методов анализа в газовой фазе к исследованию ДНК.

    На основании проведенных исследований, разработаны методические основы анализа целевых ДНК биочипов с помощью метода мягкой неразрушающей абляции. Такая задача представляет интерес с точки зрения совершенствования технологии производства биочипов. В последние годы лавинообразно возросло количество исследований с использованием методов ДНК-биочипов. Однако, сходимость профилей экспрессии, получаемых с использованием биочипов одной направленности различных ведущих мировых производителей, составляет менее 30%. Принципиальная возможность изучать непосредственно результаты гибридизации зондов и мишеней позволила бы получать достоверную информацию о продуктах гибридизации независимым способом. На основе явления мягкой неразрушающей абляции был разработан метод разрушения под действием терагерцовым излучением ДНК-ДНК гибридов на модельной ячейке биочипа и сбора целевой ДНК для последующего анализа.

    Для проведения экспериментов была проведена модернизация рабочей станции на Новосибирском ЛСЭ, подобраны параметры излучения Новосибирского ЛСЭ для абляции ДНК, не приводящие к термическому разрушению материала. Были проведены эксперименты с ДНК плазмиды pUC18 (2686 п.н.), ДНК фага Т7 (39936 п.н.), фага λ (48502 п.н.) и фрагментами ДНК фага λ.
    Основным доказательством неразрушающего характера мягкой абляции под воздействием терагерцового излучения стал анализ молекулярно-генетических свойств десорбированной ДНК. Для этого использовали ДНК плазмиды pUC18. Аблированную плазмиду собирали на фильтр, элюировали с поверхности фильтра и трансформировали ею компетентные клетки E.coli. Методами клонирования и рестрикционного анализа показано, что в десорбированном материале присутствуют молекулы плазмиды pUC18 сохранившие способность к передаче наследственной информации, обеспечивая устойчивость клеток E.coli к ампициллину. Был проведен гидролиз клонированной после абляции плазмиды ферментами рестрикции EcoR1, Hinf1 и Alw441. Рестрикционный анализ показал, что сайты рестрикции ферментов сохранили свое взаимное расположение и способность связывать фермент рестрикции. На рисунке 1 приведена электрофореграмма гидролизата аблированной плазмиды рестриктазой Alw441. На основании этих данных было сделано предположение, что в результате десорбции методом мягкой неразрушающей абляции ДНК плазмиды pUC18 переходит в аэрозольную фазу, не теряя при этом своих молекулярно-генетических свойств. Для доказательства этого предположения было проведено сравнение последовательностей ДНК нативной pUC18 и ДНК pUC18 после абляции.
    Были получены четыре ампликона размерами 517, 971, 1448 и 1510 нуклеотидов с частично перекрывающимися последовательностями с одного клона нативной плазмиды и двух клонов, полученных после абляции. Полученные ампликоны использовали в качестве матриц для секвенирования с прямым и обратным праймерами. Секвенирование проводили на автоматическом секвенаторе ABI PRISM 3100-Avant Genetic Analyzer в Межинститутском центре секвенирования ДНК СО РАН. В результате секвенирования была полностью прочитана последовательность контрольной и аблированной (прошедшей через аэрозольную фазу) плазмиды pUC18. Секвенирование продемонстрировало отсутствие различий между нативной и аблированной плазмидой pUC18. Последовательности исходной плазмиды и плазмиды после абляции совпали на 100%.
    Полученные данные свидетельствуют о том, что метод мягкой неразрушающей абляции применим для перевода в газовую (аэрозольную) фазу таких нестабильных биополимеров, как ДНК.
    Для визуализации изменений, происходящих с молекулами ДНК в аэрозоле, была проведена атомно-силовая микроскопия (АСМ) препарата ДНК pUC18 до абляции и частиц ДНК, собранных из аэрозоля. По данным АСМ молекулы плазмиды приобрели компактную упорядоченную структуру. С помощью диффузионного спектрометра аэрозолей (ДСА) были проведены измерения размеров частиц, получаемых в газовой фазе при десорбции препарата ДНК pUC18. Размер частиц по данныи ДСА составил 20,7 нм. Сопоставление измерений диффузионных размеров аэрозольных частиц плазмиды pUC18 и измерений с помощью АСМ дают основания предполагать, что в аэрозольной фазе происходит процесс конденсации молекул ДНК. На препаратах видно, что диаметр структур составляет порядка 200 нм, а высота около 10 нм. В газовой фазе наиболее вероятной формой ДНК является глобула. При осаждении частиц ДНК на слюде с помощью вакуумного пробоотборника происходит «распластывание» глобулы по поверхности, поэтому размеры структур на слюде не совпадают с размерами частиц ДНК в газовой фазе. Заметное упорядочивание структуры косвенно свидетельствует в пользу того, что в газовой фазе происходит конденсация ДНК.

    В литературе не описано конформационных изменений структуры ДНК или белков под действием электромагнитного излучения в диапазоне 120-235 мкм, однако известно, что, третичная структура молекул в газовой фазе несколько другая, чем в растворах. Согласно закономерностям, предложенным современными моделями процесса конденсации ДНК и формирования глобулы, расчет размеров глобулярной частицы, формируемой линейным полимером приблизительно описывается следующей функцией: R= (N^1/2) * U
    Где R –диаметр глобулы, N - количество звеньев цепи, U – длина звена, на котором отсутствует гибкость цепи (сегмент Куна). В случае, когда рассматриваемым полимером является ДНК, минимальный размер сегмента Куна равен длине одной пары оснований, что составляет около 0,35 нм. С увеличением изгибной жёсткости ДНК будет увеличиваться длина куновского сегмента (U) и уменьшаться количество звеньев цепи (N). В случае, когда сегмент Куна содержит n нуклеотидных пар, U = 0.35n (нм), а количество звеньев цепи уменьшится в n раз: N=L/n, где L – длина цепи в нуклеотидных парах. Подставив эти выражения? получим следующую формулу для оценки размеров глобулы: R= ((L/n)^1/2)* 0,35n
    Жёсткость молекулы определяется параметром n, с увеличением которого растет размер куновского сегмента и персистентная длина, а количество независимых звеньев уменьшается. Для различных по жёсткости молекул (т.е. при разных значениях n) наклон теоретической кривой будет разным. С увеличением n наклон кривой уменьшается. На рисунке 3 приведен график зависимости размеров глобулы ДНК от длины цепи при значении n равном 3. Точками на рисунке отмечены значения, полученные экспериментально.
    Для получения экспериментальных точек электрофоретическим методом из коммерчески доступных препаратов ДНК фага λ, гидролизованной рестриктазами HindIII и BssT1I, были препаративно выделены отдельные фрагменты ДНК-гидролизатов (таблица 1) и проведена мягкая абляция фрагментов ДНК.
    Каждый фрагмент и ДНК фагов облучали отдельно терагерцовым излучением с длиной волны 128 мкм. С помощью ДСА были проведены измерения размеров частиц, получаемых в газовой фазе при десорбции препаратов ДНК. Как видно из рисунка 3, четыре экспериментальные точки соответствуют n равному 3. ДНК фага λ формирует глобулу размером меньше теоретически предсказываемого.

    Также в меньшую сторону отклоняются размеры частиц, образованных фрагментами ДНК размерами 1500 – 3500 пар оснований. Вероятными причинами этих отклонений может быть как несовершенство предложенной формулы, так и различия в нуклеотидном составе. Таким образом, экспериментально оцененная длина сегмента Куна для ДНК в газовой фазе составляет около 1 нм, что соответствует персистентной длине 0,5 нм.
    По литературным данным персистентная длина, измеренная для различных растворов, варьирует от нескольких нанометров до контурной длины ДНК (полностью жёсткая «палка») и определяется поверхностным отрицательным зарядом, распределённым по цепи ДНК. В присутствии катионов отрицательные заряды нейтрализуются, и молекула становится более гибкой. По проведенным нами выше оценкам в газовой фазе персистентная длина ДНК составляет менее 1 нм, что свидетельствует об отсутствии распределённого заряда на поверхности ДНК в газовой фазе и хорошо согласуется с предположением о неионизирующем характере терагерцового излучения.
    Полученный результат позволяет сделать два принципиальных вывода. Во-первых, увеличение размеров частиц с увеличением длины, взятой в эксперимент ДНК, свидетельствует о том, что отдельные частицы в аэрозоле соответствуют отдельным молекулам ДНК. Если бы аэрозольные частицы формировались из нескольких цепей ДНК, при определении размеров выявлялись бы частицы, различающиеся в разы: одна молекула ДНК, две, три и т.д. В случае фрагментации молекул не было бы зависимости от длины исходной цепи ДНК. Во-вторых, полученный результат свидетельствует о неразрушающем характере абляции.
    Новый способ десорбции ДНК методом мягкой неразрушающей абляции был применён для перевода в газовую фазу синтетической целевой ДНК, связанной на модельной ячейке биочипа. В качестве модели ячейки биочипа использовали круглую пластину кристаллического кремния диаметром 20 мм и толщиной 1 мм с ковалентно пришитыми на поверхность зондами одной и той же структуры (далее – чип).
    Принципиальная схема проведения абляции целевой ДНК с гибридизованного чипа под действием излучения ЛСЭ приведена на рисунке 4. Чип, представляющий собой кремниевую пластинку с иммобилизованным олигонуклеотидом (ДНК-зонд) длиной 17 нуклеотидов, гибридизованным с нуклеотидом-образцом (целевой ДНК) длиной 90 нуклеотидов, помещали в стеклянную камеру (А), имеющую три отверстия. Первые два использовались для создания протока транспортёрного газа (сухого азота) через камеру для удаления аблированных частиц и их последующего анализа. Третье отверстие использовали для облучения поверхности чипа терагерцовым излучением.

    ДНК, аблированную с чипа, собирали на отдельные фильтры. В каждом случае на фильтр было собрано около 105-106 частиц. На рисунке 5 представлены результаты анализа амплификатов ДНК, собранной из газовой фазы. Для контроля чистоты абляции все процедуры облучения образца, сбора на фильтр, последующей элюции и амплификации были повторены с пустой кремниевой пластиной в качестве образца. На электрофореграмме (рисунок 5) каждый экспериментальный образец и контроль абляции нанесены на две дорожки. Видно, что как при длине волны излучения 126 мкм, так и при длине волны излучения 129,5 мкм перевод молекул целевой ДНК размером 90 нуклеотидов в газовую фазу прошел успешно.
    Было проведено секвенирование амплификата аблированной ДНК с использованием Big Dye®-технологии (Applied Biosystems) в Межинститутском центре секвенирования ДНК СО РАН. Сравнение исходной ДНК до гибридизации и после снятия её с гибридизованного чипа методом мягкой неразрушающей абляции показало полную идентичность последовательностей.
    Результаты эксперимента окончательно доказывают возможность разрушения ДНК-ДНК гибридов на поверхности биочипа и перевода целевых молекул ДНК в газовую фазу. Таким образом, показана принципиальная возможность снятия целевой ДНК с ячеек реальных биочипов на кремниевой основе.
    Водородные связи относят к числу слабых химических взаимодействий, для них характерна сравнительно низкая прочность: энергия водородной связи в 5–10 раз ниже, чем энергия химической связи. По энергии водородные связи занимают промежуточное положение между химическими связями и Ван-дер-Ваальсовыми взаимодействиями. Терагерцовое излучение по энергии кванта лежит в области энергий водородных и Ван-дер-ваальсовых связей. Энергия одного кванта излучения на порядки меньше энергии химических связей в молекуле, следовательно, энергии терагерцового кванта недостаточно для разрыва ковалентной связи в молекуле, а для разрыва водородной связи достаточно энергии 10 - 100 квантов. Поскольку энергия терагерцового кванта мала, можно ожидать, что в процессе десорбции в газовую фазу будут переходить молекулы, сохранившие ковалентные связи. Такой процесс был действительно обнаружен и назван мягкой неразрушающей абляцией.

    Измерение размеров ДНК в газовой фазе представляет самостоятельный интерес, поскольку проведено впервые и позволило оценить персистентную длину ДНК в новых условиях. До сих пор такие оценки проводились на основании измерений характеристик молекул, зависящих от их конформации в растворе или с помощью атомно-силовой микроскопии препаратов ДНК на плоскости. В экспериментах были получены частицы ДНК длиной от 1400 п.н. до 48500 п.н. Размеры частиц варьировали от 20 нм до 130 нм. Экспериментально полученные измерения были сопоставлены с моделью Лифшица-Гросберга-Хохлова. В диапазоне длин ДНК от 6 500 п.н. до 40 000 п.н. экспериментальные точки совпали с теоретическим расчетом. Совпадение расчетных и экспериментальных значений подтвердило правильность исходного предположения о том, что в газовой фазе при использовании для десорбции терагерцового лазера с низкой энергией кванта будут преобладать целые молекулы.
    Разрушение ДНК-гибрида на поверхности модельного биочипа и десорбция целевых ДНК позволили получить ещё одно доказательство неразрушающего характера процесса. Кроме того, эксперимент с модельным биочипом показал принципиальную возможность использования нового метода для снятия целевой ДНК, гибридизованной на биочипе.
    Перевод ДНК в газовую фазу также расширяет спектр методов анализа этого биополимера, в частности, возможности масс-спектрометрии ДНК.
    Скрыть текст


    P.S. Извиняй за опечатки и описки, если найдёшь. Торопился, работы много.

    • Картинки к большому опусу под нижним спойлером.

    AC⁄DC – TNT

    Исправлено пользователем AlexPav (14.03.17 09:11)

  • В ответ на: обсуждать без привлечения к вопросу
    Почему? Мы ж не оскорбляем и не осуждаем. Зато смотри, как резко все ребята проснулись и оживились.

    AC⁄DC – TNT

  • Не нахожу. Присутствующие здесь отличаются лишь мышлением
    зная, что рассчитывать он может только на свои действия в ожидании/на пути к результату.
    А в остальном мало кому удается выдернуть себя из "крысиных бегов" = такая же серая масса.
    Местами имеем работников более довольных и счастливых, чем собственников.

    А по поводу нахождения здесь есть 4 основные причины:
    - хочу свое дело,
    - ищет сбыт/партнеров/инвестора,
    - поиск близкого по духу окружения,
    - потешить свое эго.

    И в независимости от причины, многие надевают определенную маску.
    Поэтому на многие вещи нужно смотреть проще.
    Ну а переход на личности, это психология...
    Крыть/сказать нечего по теме обсуждения :dnknow:

    Судьба - очень удобное слово, чтобы не принимать решений.

  • Привет Кирилл, а в чем проблема со статьей про Убер?
    я признал свою ошибку публично.
    И всегда это делаю, когда есть весомые аргументы.
    В противном случае пру/гну свою линию.
    Ты разве по другому поступаешь :миг:

    Судьба - очень удобное слово, чтобы не принимать решений.

  • В ответ на: У меня есть предложение: давайте попробуем вопросы автоматизации и налогов (тема топика), обсуждать без привлечения к вопросу: Веры, религии, церкви.
    Мяса охота? Смотри не соблазнись

    Уроки налоговой схемотехники

  • В ответ на: Привет Кирилл, а в чем проблема со статьей про Убер?
    я признал свою ошибку публично.
    Проблема в том, что чтобы ты признал свою ошибку я тебе статью разжевал настолько убедительно, что тебе выбора не осталось. Ты же закинул свой тезис, а когда тебя попросили объясниться - спрыгнул с темы.

    Или разжуй что в статье фуфло или признай что не прочитав сделал преждевременный вывод.

    Уроки налоговой схемотехники

  • Да, похоже уел, раз так много букафф, но в общем да, я сначала недоглядел, что это ИК диапазон, решил, что как обычно кто то СИ балуется. Спасибо, было познавательно.

    Правда высокомерное отношения к нижнему классу, как братьям нашим меньшим, это не оправдывает. Типа мы тут молекулы поштучно гоняем, а им пусть поп голову морочит. Как я вижу мозги промываются одинаково, на всех уровнях. И за пределами своей темы нобелевские лауреаты так же тупы.

    Be yourself, no matter what they say.

  • Целью предложения было: не трогать интимное.
    Это больно для некоторых здесь присутствующих (давай без: "огласите весь список пжл"). Даже если ты считаешь что твои слова не оскорбляют (я так не считаю, но объяснить почему - не смогу).

    Ну да ладно. Предложение не проконало. Твоё право.
    Ты свободный человек, живущий в свободной стране: что хочешь то и делаешь/говоришь.

    "Никогда не спорьте с идиотами. Вы опуститесь до их уровня, где они вас задавят своим опытом". Марк Твен

  • В ответ на: Мяса охота? Смотри не соблазнись
    Кирилл, здравствуй.
    Не сдюжил я. Держу пока только: отсутствие матов, азартных игр и алкоголя (кроме 1 случая в самом начале).

    "Никогда не спорьте с идиотами. Вы опуститесь до их уровня, где они вас задавят своим опытом". Марк Твен

    Исправлено пользователем RUSLAND (14.03.17 09:52)

  • В ответ на: Как я вижу мозги промываются одинаково, на всех уровнях. И за пределами своей темы нобелевские лауреаты так же тупы.
    Попытался подъ..ть, не вышло, но ты всё равно самый умный и самый красивый?)

    В ответ на: что это ИК диапазон
    Вообще это между ИК и СВЧ.

    В ответ на: кто то СИ балуется
    .....и? Как ты понимаешь природу синхротронного излучения? Почему отделяешь его от ТГц?

    AC⁄DC – TNT

  • В ответ на: .....и? Как ты понимаешь природу синхротронного излучения? Почему отделяешь его от ТГц?
    Да особо не сложно, если у ИК, или дальнего ИК, как у вас есть шанс как то поднять молекулу, сильно не ломая, то у СИ этого не получится. Энергия кванта другая.

    Be yourself, no matter what they say.

  • Ладно, давай примиримся. Ты увидел, что я не пальцем делан, а я увидел, что ты тоже крутой мужик, соображаешь. Не вижу смысла бросаться друг в друга колкостями, вряд ли ты удовольствие от этого получаешь.

    В ответ на: высокомерное отношения к нижнему классу
    Не воспринимай так болезненно написанное здесь. Я на самом деле не такой уж засранец, как могло показаться. Думаю, тут найдутся те, кто это подтвердит. Я лишь кинул мысль, чтобы посмотреть, что интересные мне участники напишут. Кир вот отписался - не могу сказать, что со всем согласен, но для меня это всё равно интересно.

    AC⁄DC – TNT

  • Ага. Мир, дружба, жвачка.

    Be yourself, no matter what they say.

  • "Наука и техника", февраль 2017

  • Продолжение

  • Ага, раньше это называлось "головокружение от успехов". Чувак получил первый положительный результат, и сразу увидел перспективы вселенского масштаба. Парень, людей еще сжигают в клетках живьем. Это еще 10-ый век, опохмелись. Это как минимум растянется на три поколения, там никакой катастрофы, их с рождения научат другому пониманию мира.
    Петь, такое ощущение, что ты обчитался Пургеняна, и ему подобных нострадамусов. У тебя есть чем занять себя, вот и радуйся.

    Be yourself, no matter what they say.

  • Ты хоть статью-то осилил?

  • Не, там слишком много букафф, а я уже с утра уехал. А чё, кроме как в сканах ее уже по другому нельзя?

    Be yourself, no matter what they say.

  • В ответ на: Не, там слишком много букафф
    Ну, и захлопни варежку тогда.

  • В ответ на: Ну, и захлопни варежку тогда.
    Не, ну первые полторы страницы я одолел, и понял, что дальнейшее осиливать нет смысла. Поэтому варежка вполне имеет место быть.

    Be yourself, no matter what they say.

  • В ответ на: Или разжуй что в статье фуфло или признай что не прочитав сделал преждевременный вывод.
    Я думаю не нужно приводить поговорку, сам поймешь :agree:
    Для тебя так важно, ты и доказывай.

    А по теме топа
    не так страшен черт, как его малюют.
    и не так скоро придет это время = проблема гипертрофированна.

    Судьба - очень удобное слово, чтобы не принимать решений.

  • В ответ на: Ты увидел, что я не пальцем делан, а я увидел, что ты тоже крутой мужик, соображаешь.
    Алексей ну хватит уже играть в детство.
    99,9% присутствующих все равно как и кто выглядит на форуме.
    при заинтересованности сторон встреча в реале расставляет все точки...

    Показать скрытый текст
    спроси у Кирилла как выглядит твоя активность на форуме, если для тебя так это важно :спок:
    Скрыть текст

    Судьба - очень удобное слово, чтобы не принимать решений.

  • Петр пойми, те вещи которые тебе кажутся, не всегда находят отзыв в "сердцах" потребителя/клиента.
    Ты сильно увлекся этой тематикой. Понимаемо :agree:
    Но ты видишь только одну сторону медали (из серии купил машину, все на такой же ездят :eek: ).
    Быть новатором очень непросто, надеюсь в следующий раз когда тебя увижу,
    ты будешь безмятежным и слегка с жирком :friends:
    Успехов тебе с конфетоматами :respect:
    Показать скрытый текст
    надеюсь до суши дойдешь :tease:
    Скрыть текст

    Судьба - очень удобное слово, чтобы не принимать решений.

  • Петр давай с тобой прикинем. вот цифры
    я не утверждаю в их абсолютной точности и правдивости.
    Но порядок явно близкий к истине.
    Сколько от этой цифры работает на производстве (именно за станком)
    10-20%
    1,5 - 3 ...5 млн человек?
    Когда официально безработных цифра больше...

    Теперь давай разберем производство.
    НЕ РУЧНОЙ ТРУД.
    один рабочий обслуживает несколько станков. или следит за линией конвейера.
    придут роботы, контроль уменьшится на 30-50% ???
    Т.е. речь не идет о сокращении в разы.

    Согласен?

    Судьба - очень удобное слово, чтобы не принимать решений.

  • В ответ на: 99,9% присутствующих все равно как и кто выглядит на форуме.
    Вот что меня действительно удивляет, как это ты ухитряешься так идеально попадать в просак каждый раз?
    Здесь на форуме, практически всем не безразлично, как и кто выглядит на форуме. Ну разве что ты, редкое исключение.

    Be yourself, no matter what they say.

  • это ответ что статья поддержка модного тренда. не более.
    т.к. "роботы-манипуляторы" уже давно задействованы на производстве с высокой добавленной стоимостью.

    Судьба - очень удобное слово, чтобы не принимать решений.

  • кстати Кирилл нам очень доходчиво может нарисовать картину,
    КАК изменится и изменится ли картина с приходом "новых" технологий
    на примере завода по производству водки.
    Будут сокращения или нет? и насколько масштабные :миг:

    Судьба - очень удобное слово, чтобы не принимать решений.

  • Петр и не пыли, статью читал.
    Позабавил пример убера.
    объясню почему.
    навигация это п.5.
    не будем говорить о такой "мелочи" как разметка.
    несмотря на то, что неплохо знаю город, часто пользуюсь навигатором.
    т.к. лично доставляю заказы (стартап).
    разберем ее:
    1) навигатор не видит перепада высот, предлагает проехать там, где дороги не может быть.
    2) как правило отсутствуют шлакбаумы, ворота и тп преграды (есть частично в гисе)
    3) гис и тп показывают дорога есть, по факту проезда нет.

    и у меня хорошее воображение, сразу представил как обрабатывает информацию робот

    Подача машины напротив вывески аптеки здоровье, рядом с левом торцом здания дома №4.

    да сарказм. но ты же знаешь, дьявол зарыт всегда в деталях :миг:

    Судьба - очень удобное слово, чтобы не принимать решений.

  • серьезно ? и какое Вам до меня например дело :улыб:
    честно интересно :agree:

    Судьба - очень удобное слово, чтобы не принимать решений.

  • и самое важное, какое лично каждому кто и что о нем думает?
    от этого поменяется "картина" моей например жизни :eek:

    не будет завтра на форуме меня, Петра, Романа
    что-то кардинально изменится?
    ничего. все останется также...
    можно не отвечать :agree:

    Судьба - очень удобное слово, чтобы не принимать решений.

  • Петр, ты за своим французским следи, будь так любезен.

    Перевожу налоговый кодекс с русского на русский.........
    Много денег это когда в них можно книги прятать....

  • В ответ на: кстати Кирилл нам очень доходчиво может нарисовать картину,
    КАК изменится и изменится ли картина с приходом "новых" технологий
    на примере завода по производству водки.
    Будут, еще какие. Тогдашний лидер рынка ЗАО ЛВЗ "Топаз" в 2012 году разлил 8,5 млн дал водки, имея в штате 800 чел. Оснащенный автоматикой по последнему слову техники ЗАО "Сибирский ЛВЗ" разлил 5,1 млн дал, имея штат 170 чел.

    Ну то есть, 2/3 персонала позволили сократить новейшие технологии.

    Уроки налоговой схемотехники

  • В ответ на: что-то кардинально изменится?
    ничего. все останется также...
    можно не отвечать :agree:
    Не, ну можно же и ответить!
    Боюсь что так, твой понос не зависит ни от чего. Ни от погоды. Ни от ветра. Ни от здравого смысла.
    А вот некоторые, почему то заботятся о своей репутации. Просто, если какая нибудь здравая мысль произнесена попугаем, то на нее не обратят внимание, мало ли что пришло попугаю в голову. А если у кого то есть авторитет, то может измениться ход времен. Непонятно? Ну вот пример.

    Многие знания, много печали. Кто порождает знания, тот производит печаль.

    Кавычки не ставлю, близко к тексту. Простая мысль. А сколько лет ее повторяют? Ну хоть приблизительно прикинь! И кем был автор?

    Be yourself, no matter what they say.

Записей на странице:

Перейти в форум

Модераторы:

Читайте нас где удобно